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ELISA試劑盒實驗時洗滌的重要注意事項嗎?

更新時間:2023-10-10    點擊次數(shù):3598

  ELISA試劑盒實驗時洗滌的重要注意事項嗎?

 

  洗滌是ELISA實驗中是最多次數(shù)的操作,也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交又污染現(xiàn)象,實驗重復(fù)效果差的現(xiàn)象。Elisa試劑盒技術(shù)小編詳解:

  不管用多道加樣器、洗瓶、吸管,還是洗板機(jī),嚴(yán)格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實驗誤差和不同實驗之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象,請比照“手工洗板小貼士"操

  1. 洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會增高。

     

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  2.特別注意:設(shè)計實驗的時候要考慮實驗孔的位置保證甩掉洗液時,空白孔、低濃度孔或陰性對照組在上面或一側(cè)或分開最好。同時注意甩掉洗液的動作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。

  3.用干凈的濾紙,不要用衛(wèi)生紙,因為細(xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導(dǎo)致洗板不干凈,結(jié)果偏高或偏低,重復(fù)孔的數(shù)值也會相差很大。

  4.每次拍板不要重復(fù)在一個地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會對蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,最后一次一定要扣干凈。

  5.不能減少洗液體積、洗板時間和次數(shù)。洗板時間太短,洗板效果不佳。延長洗板時間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。

  洗滌是ELISA實驗中是最多次數(shù)的操作,也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象,實驗重復(fù)效果差的現(xiàn)象。

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