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單胺氧化酶(MAO)活性檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟

更新時(shí)間:2024-01-23    點(diǎn)擊次數(shù):613

  單胺氧化酶(MAO)活性檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟


  有效期:6個(gè)月

  儲(chǔ)存條件:2-8℃

  推薦:若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602

  英文名稱:Monoamine Oxidase(MAO)Activity Assay Kit

  別名:單胺氧化酶試劑盒 單胺氧化酶測(cè)試盒

  檢測(cè)方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

  注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

  規(guī)格:100T/96S

  MAO(EC1.4.3.4)包括MAO-A和MAO-B,是一種結(jié)合在線粒體外膜上的黃素蛋白,可催化神經(jīng)遞質(zhì)和生物胺氧化脫氨。單胺氧化酶與機(jī)體老化有關(guān),被認(rèn)為是衰老的標(biāo)志,其主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能。

  MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸,底物在360nm處有特征吸收峰,通過測(cè)定360nm處光吸收下降的速率,可計(jì)算MAO活性。

  若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板

  產(chǎn)品說明:

  MAO(EC1.4.3.4)包括 MAO-A 和 MAO-B,是一種結(jié)合在線粒體外膜上的黃素蛋白,可催化神經(jīng)遞質(zhì)和生物胺氧化脫氨。單胺氧化酶與機(jī)體老化有關(guān),被認(rèn)為是衰老的標(biāo)志,其主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無(wú)脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能。

  MAO 催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸,底物在 360nm 處有特征吸收峰,通過測(cè)定 360nm處光吸收下降的速率,可計(jì)算 MAO 活性。

  Monoamine Substrate(360nm) Acids

  注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

  需自備的儀器和用品:

  紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、震蕩儀、蒸餾水。

  操作步驟:

  一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

  1、 臨用前根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量取出部分提取液一、提取液二和試劑一置于 4℃預(yù)冷 30min。

  2、 組織樣本:按照樣本質(zhì)量(g):提取液一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL提取液一)加入提取液一,冰浴勻漿;1000g 4℃離心 10min,取上清,將上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的離心管,于 10000g,4℃離心 30min。棄上清,沉淀中加入 1mL 預(yù)冷的提取液二,振蕩混勻,于 16000g,4℃離心 40min,棄上清,加入 1mL 試劑一,振蕩混勻,置冰上待測(cè)。

  3、 細(xì)菌或細(xì)胞樣本:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一)加入提取液一,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 7s,總時(shí)間 3min),1000g,4℃離心 10min,取上清,將上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的離心管,于 10000g,4℃離心 30min。棄上清,沉淀中加入 1mL 預(yù)冷的提取液二,振蕩混勻,于 16000g,4℃離心 40min,棄上清,沉淀中加入 1mL 試劑一,振蕩混勻,置冰上待測(cè)。

  4、 血清(漿)或液體樣本:直接檢測(cè)。若溶液渾濁則離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。

  糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測(cè)試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來。本生試劑盒

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